Banca de QUALIFICAÇÃO: ÉRIKA ALMEIDA PRAXEDES

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: ÉRIKA ALMEIDA PRAXEDES
DATA: 24/08/2017
HORA: 08:30
LOCAL: DCAN II , lado oeste, UFERSA
TÍTULO:

Caracterização histológica e conservação de tecido somático de onça-pintada (Panthera onca) usando diferentes técnicas de criopreservação.

PALAVRAS-CHAVES:

Felídeos silvestres, criobancos, pele, congelação lenta, vitrificação, cultivo in vitro.

PÁGINAS: 32
GRANDE ÁREA: Ciências Agrárias
ÁREA: Medicina Veterinária
RESUMO:

A onça-pintada, terceiro maior felino do mundo e o maior do continente americano, é um exemplar de mamífero carnívoro de elevada importância ecológica e econômica para a biodiversidade nacional e mundial. Atualmente, no Brasil, esta espécie encontra-se classificada como vulnerável à extinção e estratégias de criopreservação representam ferramentas interessantes para a conservação de seu material genético. Dentre as estratégias aplicáveis, tem-se a criopreservação de amostras somáticas, as quais associadas com a transferência nuclear podem promover a formação de criobancos, obtenção de conhecimentos necessários para a investigação básica e aumento da população. Contudo, o emprego adequado de técnicas de criopreservação depende inicialmente do conhecimento das características histológicas e celulares dos tecidos em estudo. Portanto, os objetivos serão caracterizar histologicamente tecidos auriculares da região periférica de onças-pintadas (Experimento I), descrever e avaliar células somáticas resultantes do cultivo in vitro desses tecidos (Experimento II) e comparar três técnicas de criopreservação (congelação lenta, vitrificação direta em criotubos e vitrificação em superfície sólida) sobre a conservação tecidual (Experimento III). Para tanto, um total de seis animais, quatro machos e duas fêmeas, pertencentes a zoológicos localizados na região Nordeste do Brasil, será utilizado. Após a anestesia, amostras da região auricular periférica (1–2 cm) serão recuperadas e transportadas durante 3–7 h em meio essencial mínimo modificado por Dulbecco (DMEM) suplementado com 2,2 g/L de bicarbonato de
sódio, 10% de soro fetal bovino (SFB) e 2% de solução de antibiótico-antimicótico, a 4°C. No laboratório, amostras serão fragmentadas (9,0 mm3) e destinadas para os três experimentos. Especificamente quanto ao terceiro experimento, os fragmentos serão distribuídos nos grupos: (i) não criopreservado, (ii) congelação lenta, (iii) vitrificação direta em criotubos e (iv) vitrificação em superfície sólida, nos quais os grupos conservados serão criopreservados em DMEM contendo dimetilsulfóxido (DMSO; 1,5 M), sacarose (SAC; 0,25M) e 10% de SFB. Finalmente, de acordo com o objetivo de cada experimento, todos os fragmentos serão avaliados quanto às características estruturais usando hematoxilinaeosina, tricrômio de Masson e proteínas argirófilas relacionadas às regiões organizadoras de nucléolo (AgNOR). Além disso, células resultantes dos fragmentos cultivados serão
avaliadas quanto às características celulares/metabólicas, analisando morfologia, aderência, confluência, viabilidade por azul de tripan, atividade proliferativa e metabólica pelo ensaio de brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5 difeniltetrazólio), elaboração de curva de crescimento e estimativa do tempo de duplicação da população celular. Assim, espera-se contribuir com a geração de informações relacionadas ao perfil celular e conservação de amostras somáticas derivadas de onças-pintadas, visando a posterior utilização em biotecnologias reprodutivas.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 2515320 - ALEXANDRE RODRIGUES SILVA
Presidente - 2028000 - ALEXSANDRA FERNANDES PEREIRA
Interno - 2330828 - CARLOS EDUARDO BEZERRA DE MOURA