Banca de DEFESA: LHARA RICARLIANY MEDEIROS DE OLIVEIRA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : LHARA RICARLIANY MEDEIROS DE OLIVEIRA
DATA : 29/04/2025
HORA: 14:00
LOCAL: Plataforma Google meets
TÍTULO:

ESTABELECIMENTO DOS PROTOCOLOS DE PRODUÇÃO IN VITRO DE EMBRIÕES EM Dasyprocta leporina
(LINNAEUS, 1758) COMPARANDO AS CONDIÇÕES DE SELEÇÃO E CAPACITAÇÃO ESPERMÁTICA, MEIOS
DE FERTILIZAÇÃO E DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO

PALAVRAS-CHAVES:

roedores cavídeos, fertilização in vitro heteróloga, produção de blastocistos e
mórulas in vitro, espermatozoides epididimários, maturação e ativação oocitária artificial.

PÁGINAS: 270
RESUMO:

As tecnologias de reprodução assistida (TRAs) desempenham um papel fundamental na
conservação de espécies silvestres, como a cutia-vermelha (Dasyprocta leporina Linnaeus,
1758), um roedor de grande importância ecológica devido ao seu papel na dispersão de
sementes no continente sul-americano. Essas tecnologias oferecem abordagens inovadoras para
superar desafios reprodutivos, contribuindo para a preservação da diversidade genética dessas
espécies. Nesse contexto, a compreensão dos processos de desenvolvimento embrionário em
ambientes controlados in vitro torna-se essencial. No entanto, técnicas reprodutivas avançadas,
como a fertilização in vitro (FIV), ainda carecem de estudos específicos voltados à elucidação
das etapas iniciais envolvidas na manipulação de gametas. Diante desse cenário, o presente
estudo teve como objetivo investigar os processos reprodutivos da cutia-vermelha in vitro,
especificamente a seleção e capacitação espermática, co-incubação de gametas e suplementação
do meio de cultivo, a fim de aprofundar o conhecimento sobre sua biologia reprodutiva e,
consequentemente, otimizar o seu desenvolvimento embrionário em sistemas de reprodução
assistida. Para alcançar esses objetivos, a tese foi estruturada em quatro etapas. Na primeira
etapa, foram comparados diferentes métodos de seleção espermática 3 gradiente de densidade,
swim-up e centrifugação 3 visando identificar a técnica mais eficiente na melhoria da
capacidade fecundante e viabilidade espermática para a FIV. A segunda etapa investigou os
efeitos de agentes capacitantes, avaliando perfis de BSA de alta e baixa concentração (4 ou 15
mg/mL), na presença ou ausência de cloreto de cálcio (CaCl¢), ao longo de diferentes tempos
de incubação (1, 3 ou 6 horas). Na terceira etapa, foi analisada a influência do meio de cultivo
na FIV, comparando os meios HTF, TYH e TALP quanto ao seu impacto no desenvolvimento
embrionário. Por fim, a quarta etapa avaliou o meio mais adequado para o cultivo embrionário,
comparando SOF e o KSOM, tanto para embriões produzidos por FIV quanto para aqueles
obtidos por ativação oocitária artificial (AA). Os resultados da primeira etapa indicaram que
todos os métodos de seleção foram eficazes na obtenção de espermatozoides viáveis para a
fertilização, porém a centrifugação destacou-se por selecionar gametas com melhores
parâmetros cinéticos, morfológicos e funcionais, além de manter um equilíbrio oxidativo
favorável in vitro. Na segunda etapa do estudo, a presença de CaCl¢ mostrou-se essencial para
a viabilidade e funcionalidade espermática da cutia, reduzindo a produção de espécies reativas
de oxigênio (EROs) e promovendo altas taxas de capacitação (90,7%), reação acrossômica
(93,8%) e hiperatividade (83,0%). Além disso, a menor concentração de BSA e as 6 horas de
incubação foram essenciais para maximizar os índices de capacitação nesta espécie. Os
experimentos da terceira etapa indicaram que o meio TALP apresentou desempenho superior
em relação aos meios HTF e TYH, proporcionando um ambiente com menor estresse oxidativo
para embriões de cutia. Esse efeito resultou no aumento das taxas de clivagem (71,1%), da
proporção de embriões com ≥8 células (31,5%) e do desenvolvimento de mórulas (20,2%) após
o desenvolvimento in vitro. Finalmente, a quarta etapa demonstrou que a combinação da FIV
homóloga com o meio KSOM é a estratégia mais eficaz para a produção in vitro de embriões
em cutias-vermelhas, resultando em maior qualidade dos zigotos (84,5%) e melhores taxas de
desenvolvimento embrionário (clivagem total: 78,4%; mórula/clivados: 63,8%). Além disso, a
ativação artificial apresentou desempenho superior na formação de mórulas no DIV com o
KSOM (58,4%). Esse estudo também documentou, pela primeira vez, a produção in vitro de
blastocisto em cutias (1,7%) no grupo FIV-KSOM. Em conclusão, os resultados deste estudo
representam um marco no entendimento da biologia reprodutiva para a espécie e poderão servir
como base para novos estudos voltados à reprodução assistida, com o propósito de preservar e
garantir a continuidade das populações de cutias-vermelhas na América do Sul.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 2028000 - ALEXSANDRA FERNANDES PEREIRA
Interno - 2515320 - ALEXANDRE RODRIGUES SILVA
Externa à Instituição - MAYRA ELENA ORTIZ D'AVILA ASSUMPÇÃO - USP
Externo à Instituição - IVAN CUNHA BUSTAMANTE FILHO - PESQUISADOR
Externa à Instituição - SHEYLA FARHAYLDES SOUZA DOMINGUES - UFPA