Construção de biblioteca gênica de moléculas scFv de anticorpos anti-placentas sinepteliocoriais
células trofoblásticas de ruminantes, placentoma, imunoglobulina de galinha, variabilidade gênica
Galinhas de linhagem de postura foram imunizadas com um macerado de placentomas caprino e ovino e um segundo grupo com macerado de placentomas bovino. As imunizações se repetiram a cada 15 dias para os dois grupos experimentais. Os ovos foram coletados ao longo das 04 imunizações, a IgY isolada, e sua concentração mensurada. Após 60 dias do início das imunizações, as galinhas foram sacrificadas, seus baços isolados e fragmentados para extração de RNA total pelo método de Trizol. Realizada a síntese do cDNA, amplificou-se, através de PCR, os fragmentos variáveis de imunoglobulinas G aviária de cadeia leve (VL) e de cadeia pesada (VH). Fragmentos de VL e VH foram utilizados na constituição do produto final recombinante pelo processo de overlap-PCR. Os resultados preconizam a viabilidade da construção de biblioteca gênica de scFv anti-placenta caprina e ovina e sua utilização na confecção de kits de diagnósticos para diversas situações fisiológicas de células trofoblásticas pertencentes a placentas destas espécies.