INFLUÊNCIA DO DISPOSITIVO MICROFLUÍDICO NA SELEÇÃO ESPERMÁTICA, FERTILIZAÇÃO IN VITRO E DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO DE CAPRINOS
Avaliação seminal; espermatozoides; microfluídica; PIVE.
A seleção espermática consiste em etapa fundamental para alcançar sucesso em técnicas reprodutivas, como a PIVE. Alguns métodos de seleção já são utilizados, porém não são totalmente eficientes ou causam danos nas amostras de sêmen. Devido a isso, a tecnologia microfluídica passou a ser estudada e possui destaque em diversas áreas, incluindo a seleção espermática. Entretanto, de acordo com nosso conhecimento, ainda não foram realizados estudos sobre o uso dessa tecnologia na espécie caprina, considerada relevante por ser modelo biológico para muitas pesquisas, inclusive voltadas para preservação e recuperação de espécies ameaçadas de extinção. O objetivo da pesquisa é selecionar espermatozoides de caprinos e realizar a fertilização in vitro com o uso de dispositivo microfluídico e, posteriormente, cultivar os embriões em placa de cultivo convencional. Serão utilizados 10 amostras de sêmen colhidas a partir de vagina artificial e 10 amostras de espermatozoides epididimários coletados de complexos testículos-epidídimos provenientes de abatedouro. A seleção será realizada com uso de tecnologia microfluídica e comparada com a técnica de Percoll®. As avaliações consistirão na análise computadorizada de espermatozoides (CASA), integridade de membrana plasmática, atividade mitocondrial, morfologia e funcionalidade de membrana. Logo após, os espermatozoides selecionados serão fecundados com oócitos previamente maturados, ocorrendo tanto em dispositivo microfluídico, como em placa convencional. A última etapa consiste no cultivo e avaliação dos futuros embriões que será realizada em equipamento com tecnologia timelapse, permitindo que imagens sejam gravadas para documentação. A pesquisa identificará as melhorias que a microfluídica proporcionará ao sêmen de caprinos, assim como confirmará se o dispositivo apresenta condições adequadas para a fertilização.