Banca de QUALIFICAÇÃO: ARTHUR EMANNUEL DE ARAÚJO LAGO

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: ARTHUR EMANNUEL DE ARAÚJO LAGO
DATA: 18/12/2019
HORA: 15:00
LOCAL: Mini Auditório do Centro Integrado De Laboratórios Em Ciência Animal E Recursos Hídricos Do Semi-Ári
TÍTULO:

CRIOPRESERVAÇÃO DE TECIDO TESTICULAR DE CÃES PRÉ-PÚBERES.

PALAVRAS-CHAVES:

EG, DMSO, VSS, congelação lenta, tecido gonadal.

PÁGINAS: 29
GRANDE ÁREA: Ciências Agrárias
ÁREA: Medicina Veterinária
RESUMO:

Os cães são canídeos domésticos que vem passando por um processo gradual de melhoramento genético auxiliado por biotécnicas reprodutivas. Em machos pré-púberes, a criopreservação de tecido testicular é a única opção para preservar a fertilidade pois estes animais ainda não são capazes de produzir espermatozoides. Por este motivo, este trabalho se propõe a testar dois protocolos de criopreservação de tecido testicular, a congelação lenta (CL) e a vitrificação em superfície sólida (VSS), utilizando os crioprotetores dimetilsulfóxido (DMSO) e etilenoglicol (EG) em diferentes concentrações. Para isto, serão coletados 10 pares de testículos de 10 cães pré-púberes por orquiectomia, e em seguida os testículos serão divididos em fragmentos de 9 mm³ (3x3x1 mm) e submetidos a análise morfológica e avaliação da apoptose celular, sendo este considerado o grupo controle. Os fragmentos que irão para a congelação passarão um período imersos em soluções de congelação ou de vitrificação contendo os ACPs nas concentrações desejadas, de acordo com cada grupo. A vitrificação em superfície sólida será feita pela colocação dos fragmentos sobre uma superfície metálica em contato com nitrogênio líquido, e a congelação lenta (CL) será feita usando um freezer programável a -80°C antes de submergir as amostras em botijões contendo nitrogênio líquido. Em cada técnica de congelação serão usados 8 fragmentos para cada tratamento com os ACPs, formando os grupos testes, sendo para a vitrificação os grupos usando DMSO e EG nas concentrações de 3 e 6, e na congelação lenta, DMSO e EG nas concentrações de 1,5 e 3 M. Após 1 semana mantidos em botijões criobiológicos a -196°C, as amostras serão aquecidas e serão avaliadas quanto à morfologia por histologia clássica, à viabilidade por digestão enzimática seguida de avaliação por azul de tripan. Será também realizado a avaliação da fragmentação de DNA por ensaio com TUNEL, e a avaliação da proliferação celular por AgNOR pela contagem das regiões organizadoras de nucléolos (NORs). Os resultados serão expressos em média + erro padrão, considerando o valor de significância de P < 0,05 e os dados serão submetidos aos testes estatísticos mais adequados para a comparação das médias e identificação de diferenças entre os tratamentos.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 2515320 - ALEXANDRE RODRIGUES SILVA
Interno - 2028000 - ALEXSANDRA FERNANDES PEREIRA
Externo à Instituição - GABRIELA LIBERALINO LIMA - IFCE