Banca de QUALIFICAÇÃO: JOÃO VITOR DA SILVA VIANA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : JOÃO VITOR DA SILVA VIANA
DATA : 14/04/2023
HORA: 14:00
LOCAL: Online
TÍTULO:

AVALIAÇÃO DAS CONDIÇÕES DE CULTIVO IN VITRO, CRIOPRESERVAÇÃO E SINCRONIZAÇÃO EM G0/G1 DE CÉLULAS SOMÁTICAS DERIVADAS DO GATO-DO-MATO-PEQUENO (Leopardus tigrinus SCHREBER, 1775

PALAVRAS-CHAVES:

pequenos felídeos, criobancos de células somáticas, conservação ex situ in vitro.

PÁGINAS: 41
RESUMO:

O leopardus tigrinus é uma espécie distribuída ao longo do território brasileiro, apresentando
importante papel como mesopredador. Semelhante a outros felídeos silvestres, esta espécie é alvo
recorrente da interferência humana em seu habitat, ocasionando a necessidade de realização de
estratégias de conservação para a espécie. Neste contexto, o desenvolvimento de criobancos de
células somáticas pode ser uma alternativa para a conservação da espécie, uma vez que permite
armazenar uma grande diversidade de indivíduos, independente do sexo e estágio reprodutivo,
quando comparado aos criobancos de gametas. Portanto, o estudo tem como objetivo avaliar as
condições de cultivo in vitro, criopreservação e sincronização em G0/G1 de células somáticas
derivadas de L. tigrinus. Para tanto, fragmentos de pele auricular serão obtidos de cinco animais
provenientes de zoológicos do Ceará. Após o cultivo destes fragmentos, células obtidas serão
identificadas quanto ao seu tipo por imunofluorescência, e serão distribuídas em três
experimentos. No primeiro experimento, o qual consistirá em avaliar as condições de cultivo e a
criotolerância das células somáticas, células serão cultivadas em diferentes passagens (terceira,
sexta e décima passagem) e submetidas à criopreservação. No segundo experimento, o qual
avaliará diferentes concentrações de dimetilsulfóxido (2,5 e 10% de DMSO), na ausência e
presença de 0,2 M de sacarose e/ou 100 mM de L-prolina, células serão criopreservadas por
congelação lenta e avaliadas antes e após a criopreservação. Em ambos os experimentos, células
serão avaliadas quanto à morfologia, viabilidade, atividade metabólica, atividade proliferativa,
níveis das espécies reativas de oxigênio (EROs), potencial de membrana mitocondrial (ΔΨm), e
níveis apoptóticos. Adicionalmente, no primeiro experimento, células serão avaliadas em sistema
sem a presença de antibiótico, análise cromossômica, e ultraestrutural. No terceiro experimento,
o qual consistirá em avaliar as condições de sincronização em G0/G1, células serão avaliadas após
diferentes condições [incubação com roscovitina a 7,5, 15 e 30 µM, inibição por contato e
privação de soro fetal bovino] por diferentes tempos (12–96 h). Neste experimento, células serão
avaliadas quanto à morfologia, viabilidade, níveis de apoptose e capacidade de sincronização em
G0/G1. Finalmente, espera-se com essa proposta desenvolver algumas das metodologias
envolvidas na formação de bancos de recursos somáticos de L. tigrinus, visando contribuir para
sua conservação.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 2028000 - ALEXSANDRA FERNANDES PEREIRA
Externo à Instituição - HERLON SILVA
Externa à Instituição - MARIA CLAUDIA DOS SANTOS LUCIANO - UFC