CARACTERIZAÇÃO E CRIOPRESERVAÇÃO DE FOLÍCULOS OVARIANOS PRÉ-ANTRAIS DE JUMENTAS DA RAÇA NORDESTINA
Asininos, Foliculogênese, Oócito, Ovário, Células da granulosa
Os jumentos (Equus assinus) são animais historicamente relevantes para a ocupação de áreas inóspitas em todo o mundo, mas tem perdido espaço devido à modernização dos centros urbanos e da mecanização agrícola e transporte motorizado. Assim, muitas raças de jumentos já foram extintas ou encontramse em rápido processo de queda populacional, dentre estas, a raça Nordestina, endêmica do Brasil. Uma das estratégias de conservação é o uso de biotecnologias que favoreçam a reprodução assistida, como a manipulação de oócitos inclusos em folículos préantrais (MOIFOPA) que maximiza a disponibilidade de oócitos para outras biotécnicas. O ponto de partida para o uso desta e outras técnicas é conhecer detalhes da fisiologia reprodutiva e dos gametas da espécie ou raça que se deseja manipular. O objetivo desta tese é caracterizar e conservar por meio da vitrificação a população de folículos ovarinos préantrais (FP) em fêmeas asininas da raça Nordestina. No primeiro experimento, vinte fêmeas com idade média de 5,11 ± 3,24 anos e peso médio de 105,20 ± 18,63 kg, constituíram o grupo de estudo. As mesmas foram submetidas a procedimento de ovariectomia guiada por laparoscopia para coleta dos ovários. Assim como nos demais equídeos, os ovários das jumentas apresentam formato reniforme e suas zonas corticais, incluindo a fossa ovariana, foram extraídas. Os córtex foram fixados com carnoy, desidratados com etanol em concentrações crescentes (70 a 99%), clarificados usando xilol e finalmente inclusos em blocos de parafina histológica. Estes blocos foram sequencialmente seccionados num micrótomo em frações de 7μm. Uma a cada 120 frações foi montada em lâminas de vidro e coradas com hematoxilinaeosina e lidas em microscópio ótico invertido. Os FPs que apresentaram núcleo visível foram fotografados, mensurados com uso de software especializado e classificados como primordiais, primários e secundários. Os FPs classificados e contados foram identificados como normais ou degenerados. A população de FPs foi estimada usando a fórmula: (número de PF observados × número total de secções × espessura das secções) dividido por (número de secções observadas × diâmetro médio do núcleo dos oócitos). A população média estimada foi de 21.135,3 ± 10.646,1 FPs por animal. Destes, 91,3% foram identificados como primordiais, 8,9% como folículos primários e 0,4% como secundários. Folículos com múltiplos oócitos foram observados em todos os animais, todos folículos primordiais, representando 0,99% do total de folículos. A população de PF estimada estava distribuída entre os ovários direito e esquerdo, em 54,63% e 45,37% respectivamente. A maior parte dos PFs foi considerada morfologicamente normais (90,23%) e a menor parcela, degenerados (9,77%). Foi identificada uma relação inversamente proporcional entre a idade e a população folicular, identicamente à relação entre peso e população folicular. Este trabalho apresentou de forma inédita a estimativa de folículos préantrais ovarianos em jumentos da raça nordestina. No segundo experimento, que se encontra em preparação, o tecido ovariano de animais do mesmo grupo foi submetido a procedimento de vitrificação, utilizandose como crioprotetores o dimetilsulfóxido (DMSO) e etilenoglicol (EG) em concentrações e combinações distintas, isoladamente ou associados. Os resultados deste experimento serão demonstrados na forma de artigo por ocasião da defesa da tese.