Banca de DEFESA: ANA KAROLINA MELO OLIVEIRA BARROS

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : ANA KAROLINA MELO OLIVEIRA BARROS
DATA : 27/02/2026
HORA: 16:30
LOCAL: Google Meet
TÍTULO:

Caracterização in silico e expressão heteróloga da proteína YKUE recombinante de Corynebacterium pseudotuberculosis para fins imunobiológicos

PALAVRAS-CHAVES:

Linfadenite caseosa; Escherichia coli; Imunoinformática; metalofosfoesterase; antigenicidade.

PÁGINAS: 100
RESUMO:

A linfadenite caseosa (LC), causada pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis, permanece um importante desafio para a produção de pequenos ruminantes, devido à eficácia limitada e à segurança questionável das vacinas atualmente disponíveis, além da ineficácia do tratamento antibiótico após a formação de abscessos, o que reforça a necessidade da identificação de novos antígenos com potencial para aprimorar estratégias profiláticas e diagnósticas. Diante desse contexto, o presente estudo teve como objetivo analisar in silico a proteína YkuE de C. pseudotuberculosis, realizar sua expressão heteróloga e avaliar seu potencial antigênico in vitro. Para isso, foram conduzidas análises computacionais para predição de propriedades físico-químicas, antigenicidade, alergenicidade e identificação de epítopos de células B e T, além da modelagem, refinamento estrutural e estudos de acoplamento molecular com o receptor Toll-like 2 (TLR2). O gene ykuE foi clonado no vetor de expressão pET28a e expresso heterologamente em Escherichia coli BL21 Star (DE3), sendo a proteína recombinante purificada e utilizada em ensaios de reconhecimento imunológico com soros de ovelhas e cabras naturalmente infectadas e soros negativos. As análises in silico indicaram que a YkuE é uma proteína estável, não alergênica e moderadamente antigênica, contendo múltiplos epítopos preditos para células B e T, enquanto a modelagem estrutural confirmou a confiabilidade da sua estrutura tridimensional e o acoplamento molecular revelou forte interação com o TLR2, sugerindo seu envolvimento no reconhecimento imune inato. A proteína recombinante YkuE apresentou massa molecular aparente de aproximadamente 37 kDa e foi recuperada predominantemente na fração insolúvel, sendo reconhecida especificamente por soros de animais naturalmente infectados, sem reatividade com soros negativos. Em conjunto, os resultados demonstram que a YkuE é um antígeno naturalmente direcionado durante a infecção por C. pseudotuberculosis em pequenos ruminantes, evidenciando seu potencial para aplicação no desenvolvimento de vacinas recombinantes e ferramentas de imunodiagnóstico para o controle da linfadenite caseosa.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 3652543 - FRANCISCO SILVESTRE BRILHANTE BEZERRA
Externa à Instituição - MARA ANDRADE COLARES MAIA - UFPel
Externo à Instituição - TALLYSON NOGUEIRA BARBOSA - PESQUISADOR