Banca de QUALIFICAÇÃO: YARA LETÍCIA FRUTUOSO E SILVA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : YARA LETÍCIA FRUTUOSO E SILVA
DATA : 09/07/2026
HORA: 14:00
LOCAL: Sistema Híbrido: Auditório do CCBS e plataforma googlemeet
TÍTULO:

Avaliação da estabilidade genética e funcional de fibroblastos de onça-parda (Puma concolor Linnaeus, 1771) submetidos ao cultivo prolongado e à criopreservação

PALAVRAS-CHAVES:

Felídeos silvestres; Biobanco; Células somáticas; Cultivo in vitro; Congelação lenta.

PÁGINAS: 40
RESUMO:

O cultivo in vitro e a criopreservação de fibroblastos constituem ferramentas importantes para a formação de biobancos e desenvolvimento de tecnologias voltadas à conservação ex situ da biodiversidade. Em felídeos silvestres, como a onça-parda, essas abordagens permitem a preservação do seu material genético, possibilitando sua aplicação em estudos relacionados à reprogramação celular. Para essa espécie, existem protocolos para o estabelecimento e a criopreservação de fibroblastos, demonstrando a viabilidade dessas estratégias. Contudo, é necessário avançar na compreensão da qualidade genética e funcional dessas células ao longo do cultivo prolongado, assim como na eficiência da criopreservação, uma vez que estudos anteriores relatam danos estruturais e funcionais envolvidos nesse processo. Nesse contexto, esse estudo objetiva avaliar os efeitos do cultivo in vitro prolongado e de diferentes soluções crioprotetoras sobre a qualidade funcional e genética de fibroblastos dérmicos de onça-parda. Para tanto, a proposta será desenvolvida em duas etapas. Na primeira etapa, fibroblastos isolados a partir da pele auricular serão submetidos a diferentes tempos de cultivo in vitro (2ª, 4ª, 6ª, 8ª, 10ª, 12ª e 14ª passagem), sendo avaliados por meio de três abordagens experimentais. No primeiro experimento, serão analisadas a morfologia, ultraestrutura, integridade da membrana plasmática e o índice de apoptose. No segundo experimento, serão avaliadas a atividade proliferativa e metabólica, caracterização por imunocitoquímica e o perfil cromossômico. No terceiro experimento, serão quantificados os níveis de espécies reativas de oxigênio, potencial de membrana mitocondrial e expressão gênica associada à senescência celular. Na segunda etapa, fibroblastos serão criopreservados nas condições: a) controle (não submetido à criopreservação); b) 10% dimetilsulfóxido (DMSO); c) 10% DMSO e 10% soro fetal bovino (SFB); d) 10% DMSO e 0,2 M sacarose (SAC); e) 10% DMSO, 5 mM de L-Prolina (L-Prol); f) 10% DMSO, 10% SFB e 0,2 M SAC; g) 10% DMSO, 10% SFB e 5 mM L-Prol; h) 10% DMSO, 0,2 M SAC e 5 mM L-Prol; i) 10% DMSO, 10% SFB, 0,2 M SAC e 5 mM L-Prol. Em seguida, as células serão descongeladas e submetidas as avaliações conforme descritas na etapa anterior. Dessa forma, espera-se que os resultados obtidos permitam identificar os efeitos do cultivo in vitro prolongado sobre a estabilidade genética e funcional de fibroblastos de onça-parda. Paralelamente, a avaliação de diferentes combinações de crioprotetores, com destaque para a incorporação da L-prolina às soluções tradicionalmente empregadas, poderá indicar estratégias mais eficientes para a preservação da viabilidade e da funcionalidade dessas células após a criopreservação. Em conjunto, os achados desta pesquisa poderão contribuir para o aperfeiçoamento dos protocolos de cultivo e criopreservação de células somáticas da espécie, fortalecendo a formação de biobancos e ampliando o potencial dessas linhagens em programas de conservação de felídeos silvestres.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 2028000 - ALEXSANDRA FERNANDES PEREIRA
Interno - 2330828 - CARLOS EDUARDO BEZERRA DE MOURA
Externa à Instituição - ALANE PAINS OLIVEIRA DO MONTE - UNIVASF
Externo à Instituição - HERLON SILVA - UECE