Banca de QUALIFICAÇÃO: SUELI DE OLIVEIRA LIMA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : SUELI DE OLIVEIRA LIMA
DATA : 13/12/2024
HORA: 14:00
LOCAL: Online - via Google Meet
TÍTULO:

AVALIAÇÃO DAS CONDIÇÕES DE MANIPULAÇÃO E CULTIVO DE CÉLULAS SOMÁTICAS E OÓCITOS PARA A CONSERVAÇÃO DO RATO-DE-NARIZ-VERMELHO (Wiedomys pyrrhorhinos WIED-NEUWIED, 1821)

PALAVRAS-CHAVES:

Roedores silvestres, biobancos, fibroblastos, maturação oocitária, desenvolvimento embrionário

PÁGINAS: 45
RESUMO:

As técnicas de reprodução assistida (TRAs), especialmente a clonagem por transferência nuclear de célula somática (TNCS), representam ferramentas essenciais para a geração de conhecimento e conservação genética da espécie. Embora o rato-de-nariz-vermelho não esteja ameaçado de extinção, estudos nesta espécie contribuiria para a conservação de seu material genético, bem como serviria como modelo experimental para roedores em risco de extinção. Portanto, o projeto objetiva avaliar as condições de manipulação e cultivo de células somáticas (primeira etapa) e oócitos (segunda etapa), visando o emprego destas células na TNCS. A primeira etapa consistirá em três experimentos, envolvendo a obtenção de linhagens celulares após análise das condições de cultivo de acordo com a 2, 5ª, 8ª, 10ª e 13ª passagem, e criotolerância (experimento 1), formação de criobancos de células somáticas após comparação de 2,5% e 10% de dimetilsulfóxido na ausência e presença de L-prolina, sacarose e sua combinação (experimento 2), e avaliação da habilidade das células em serem sincronizadas em G0/G1 após inibição por contato, privação com soro fetal bovino e roscovitina em diferentes tempo de análise (experimento 3). Nesta etapa, as células serão avaliadas quanto à caracterização do tipo celular, morfologia, viabilidade, atividade proliferativa, metabolismo, estresse oxidativo usando distintas técnicas microscópicas e espectofotométricas. A segunda etapa consistirá em dois experimentos, envolvendo a obtenção de oócitos maturados avaliando diferentes concentrações do hormônio folículo-estimulante (experimento 1) e sua associação com fator de crescimento epidermal em diferentes concentrações (experimento 2). Todos os oócitos submetidos a essas condições de maturação serão ativados artificialmente e embriões avaliados de acordo com a cinética de desenvolvimento, número de blastômeros, e estresse oxidativo. Adicionalmente, oócitos antes da ativação artificial serão avaliados quanto à morfometria, e maturação nuclear. Finalmente, pretende-se contribuir na conservação de rato-de-nariz-vermelho, visando o desenvolvimento da clonagem por TNCS e demais TRAs correlatadas como estratégia em programas de conservação.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 2028000 - ALEXSANDRA FERNANDES PEREIRA
Externa à Instituição - MANOELA DE OLIVEIRA REBOUÇAS
Externo à Instituição - RIBRIO IVAN TAVARES PEREIRA BATISTA - UFF