Banca de DEFESA: BEATRIZ DANTAS FERNANDES

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : BEATRIZ DANTAS FERNANDES
DATA : 26/04/2024
HORA: 14:00
LOCAL: Sala 22 - Proppg
TÍTULO:

INFLUÊNCIA DO PLASMA ATMOSFÉRICO FRIO E DA QUIMIOTAXIA NA SELEÇÃO DE ESPERMATOZOIDES DE CARNEIROS

PALAVRAS-CHAVES:

Hélio. Molhabilidade. Reprodução. Pequenos ruminantes. Seleção espermática.

PÁGINAS: 80
RESUMO:

A seleção de espermatozoides viáveis e íntegros é crucial para alcançar o sucesso nas taxas de fertilização. No entanto, métodos que envolvem centrifugação podem ser prejudiciais às células. Por essa razão, estão sendo estudados dispositivos microfluídicos que permitam a seleção dos espermatozoides com base em atrativos para as células, sem interferências externas. O polidimetilsiloxano (PDMS) é o material mais utilizado na confecção de dispositivos microfluídicos, porém é extremamente hidrofóbico, dificultado o preenchimento de canais do dispositivo. Para contornar o problema, a aplicação de plasma atmosférico pode causar alteração na superfície, tornando-a hidrofílica. Entretanto, poucos estudos relatam os parâmetros utilizados no plasma, ou sua vida útil para uso. Associado a isso, até o momento não há estudos com seleção espermática em carneiros, assim como não há estudos avaliando a influência da aplicação do plasma atmosférico nos dispositivos microfluídicos. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi inicialmente definir parâmetros do plasma atmosférico para modificação de superfície de PDMS e avaliar o tempo útil para seu uso. Posteriormente, buscou-se avaliar a eficiência de um dispositivo microfluídico na seleção de espermatozoides de carneiros a partir da quimiotaxia, e verificar a influência da aplicação do plasma atmosférico na seleção. Para o primeiro experimento, foram fabricados discos de PDMS que receberam o tratamento com plasma e foram avaliados após 0h, 3h, 6h, 9h e 24h para molhabilidade. Após isso, foram fabricados dispositivos microfluícidos com PDMS para o experimento 2, que possuíam um reservatório de entrada interligado a três reservatórios de saída. O grupo controle consistiu em dispositivos não tratados, enquanto o grupo tratamento correspondia aos dispositivos tratados com plasma durante 15 minutos. Imediatamente após a aplicação, os dispositivos eram preenchidos com três meios diferentes nos reservatórios de saída, sendo eles: meio de FIV, solução NaCl 0,9%, e meio de MIV. Após isso, o reservatório de entrada foi preenchido com amostra de espermatozoides epididimários de carneiro. O dispositivo foi incubado por 35 minutos e, posteriormente, as amostras foram coletadas para avaliar os parâmetros de motilidade através do CASA, morfologia com uso de rosa bengala, e viabilidade e integridade, através de microscopia de fluorescência e teste hisposmótico, respectivamente. Os dados foram expressos em valores de média ± desvio padrão. Primeiramente, os dados foram examinados quanto à normalidade usando o teste de Shapiro-Wilk e para a homocedasticidade usando teste de Levene. Diferenças foram consideradas significativas quando p < 0,05. Em relação à molhabilidade, foi possível verificar que a aplicação do plasma atmosférico alterou a superfície de PDMS para altamente hidrofílica até 3 horas após a aplicação (p < 0,05). Já em relação à seleção, observou-se que a aplicação do plasma atmosférico não influenciou na seleção de espermatozoides. Na avaliação da quimiotaxia, o meio FIV apresentou resultados promissores, sendo semelhante em todos os parâmetros avaliados com o gradiente de Percoll. O dispositivo microfluídico foi eficiente na seleção de espermatozoides de carneiros quando comparado ao gradiente de Percoll. A partir deste estudo é possível avançar na técnica de microfluídica e buscar melhorias para que espermatozoides selecionados em dispositivo microfluídico sejam significativemente superiores a qualquer outro método, justificando o maior investimento e aplicações na área da microfluídica.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - MARICY APPARÍCIO FERREIRA - UNESP
Interno - 2515320 - ALEXANDRE RODRIGUES SILVA
Interno - 2330828 - CARLOS EDUARDO BEZERRA DE MOURA
Externa ao Programa - 3110135 - CIBELE DOS SANTOS BORGES - nullPresidente - 1305260 - MARCELO BARBOSA BEZERRA